1.2 Qu’est-ce qu’une droite de calibration ?

Un type d’analyse (bio)chimique courant consiste à utiliser une réaction chimique dont un des produits est coloré. La mesure de l’absorbance de la lumière à une longueur d’onde précise à l’aide d’un spectrophotomètre permet de déterminer la concentration du réactif cible en solution. En effet, cette absorbance est, la plupart du temsp, proportionnelle à la concentration.

Avant de pouvoir calculer la concentration du réactif, il faut déterminer la relation qui existe ente l’absorbance mesurée et cette même concentration. Cela se fait en mesurant une série de solutions étalons de concentrations connues. Si nous réalisons un graphique en nuage de points avec la concentration des solutions étalons en abscisse et l’absorbance observée en ordonnée, nous pouvons constater que, la plupart du temps, les points s’alignent le long d’une droite. L’étalonnage de notre méthode de mesure passe, donc, par la détermination de la droite en question. Cette droite s’appelle la droite de calibration et la méthode statistique qui permet de la déterminer s’appelle une régression linéaire par les moindres carrés. Nous étudierons bien plus en détails la régression linéaires aux deux chapitres suivants. Ici, nous allons l’aborder d’un point de vue extrêmement pratique, sans entrez dans les considérations théoriques.

Une fois la droite de calibration calculée, nous pouvons l’utiliser pour déterminer la concentration d’échantillons inconnus à partir de leur absorbance mesurée. Nous pouvons aussi calculer quelques statistiques complémentaires utiles, telles que l’intervalle de confiance sur les mesures, la limite de détection (LOD) et la limite de quantification (LOQ). Nous allons aborder tout ceci en l’illustrant d’un cas concret d’analyse de nitrates dans de l’eau de mer.